普通實(shí)驗(yàn)室的壓力設(shè)計(jì)主要分以下兩種情況：
1)實(shí)驗(yàn)室為負(fù)壓：一般產(chǎn)生污染、有毒有害物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室，均設(shè)計(jì)為負(fù)壓。如化學(xué)類實(shí)驗(yàn)室、生物安全實(shí)驗(yàn)室等，其目的是避免實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的污染物溢出對(duì)其他實(shí)驗(yàn)室造成不利影響。
2)實(shí)驗(yàn)室為正壓：一般潔凈實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室等，均設(shè)計(jì)為正壓，其目的是為了避免外部環(huán)境中可能存在的污染物進(jìn)人該實(shí)驗(yàn)室,對(duì)實(shí)驗(yàn)過程產(chǎn)生污染。
1.1 常見PCR實(shí)驗(yàn)室壓差設(shè)計(jì)
PCR實(shí)驗(yàn)室的各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域之間應(yīng)形成單向流程的屏障保護(hù)，環(huán)境壓力從試劑準(zhǔn)備區(qū)到產(chǎn)物分析區(qū)逐漸遞減。
1)試劑準(zhǔn)備區(qū)是工藝流線的開始，設(shè)計(jì)為正壓或常壓，避免外界環(huán)境的污染。
2)樣品制備區(qū)一般為常壓或負(fù)壓，大多數(shù)情況下設(shè)計(jì)成二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室，避免實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物溢出，污染外界環(huán)境。
3)核酸擴(kuò)增區(qū)為負(fù)壓，避免實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物溢出，污染外界環(huán)境。
4)產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，通常壓力設(shè)計(jì)為最低，避免實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物溢出，污染外界環(huán)境。
1.2 PCR實(shí)驗(yàn)室壓差設(shè)計(jì)優(yōu)化建議
上述PCR 實(shí)驗(yàn)室的壓差設(shè)計(jì)原則上是正確的，但存在兩個(gè)比較明顯的缺陷：
1)緩沖間和專用走廊的功能重合，無法發(fā)揮“緩沖間+專用走廊”的最大作用。
2)上述壓差設(shè)計(jì)只能避免“實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物不外溢”“外界環(huán)境不侵入”二者中的一項(xiàng)。在同時(shí)設(shè)有專用走廊和緩沖間的情況下，可以對(duì)壓差設(shè)計(jì)進(jìn)行優(yōu)化，以實(shí)現(xiàn)2項(xiàng)功能的兼顧。
1.2.1 不帶緩沖間的PCR實(shí)驗(yàn)室
不帶緩沖間時(shí)，4個(gè)區(qū)域的建議壓差設(shè)計(jì)見圖1。專用走廊最好設(shè)計(jì)為微正壓，以防止PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)域外部氣流的進(jìn)入。
1.2.2 帶緩沖間的PCR實(shí)驗(yàn)室
在減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。緩沖間通常設(shè)置在專用走廊與實(shí)驗(yàn)區(qū)之間,起到隔離作用，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外的空氣交換，防止在物流傳遞過程中產(chǎn)生交叉污染，同時(shí)起到控制壓差、保證實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈度的作用。
PCR實(shí)驗(yàn)室污染擴(kuò)散控制的關(guān)鍵在于隔離，而非氣流的擴(kuò)散。PCR實(shí)驗(yàn)室中，存在兩類壓差控制：一類是4個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的相互壓差；另一類是每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)、緩沖間、專用走廊間的相互壓差。前者用以實(shí)現(xiàn)單向的工藝流線，避免傳遞窗在2扇門不慎同時(shí)開啟時(shí)的氣流逆轉(zhuǎn);后者用以保證每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域氣流的獨(dú)立性，避免受到共用的專用走廊影響。
工作時(shí)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力均高于緩沖間。氣流擴(kuò)散方向?yàn)?/span>4個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域和專用走廊的空氣分別流向4個(gè)緩沖間。由于設(shè)置了緩沖間，既可防止每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)受到專用走廊空氣中可能存在的污染，保證實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的質(zhì)量，同時(shí)還可防止實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的污染物隨空氣流人專用走廊，對(duì)工作人員造成危害。
當(dāng)產(chǎn)物分析區(qū)不設(shè)緩沖間時(shí)，壓差設(shè)計(jì)邏輯同產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)有緩沖間時(shí)一致。試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、核酸擴(kuò)增區(qū)、專用走廊的空氣分別流向緩沖間1、2、3，此外還有部分專用走廊的空氣流向產(chǎn)物分析區(qū)。
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