PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域劃分
1、主要功能區(qū)劃分
試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)、純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)、后純化區(qū)。
2、設(shè)計(jì)原則
按國(guó)家衛(wèi)生部的要求,各實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的,不能直通,每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準(zhǔn)備區(qū),標(biāo)本制備區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū),純化區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)到后純化區(qū),避免發(fā)生交叉污染。
3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設(shè)計(jì)為10萬(wàn)級(jí)。閘間(緩沖間)設(shè)計(jì)為正壓區(qū),保證與外界環(huán)境隔離,避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)域的氣溶膠污染。
氣流設(shè)計(jì)
人流物流設(shè)計(jì)各行其道,避免交叉混雜,整個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)一個(gè)公用走廊,工作區(qū)域之間設(shè)計(jì)試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。
1、物流:在試劑準(zhǔn)備區(qū)與標(biāo)本制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)與PCR擴(kuò)增區(qū)之間,以及擴(kuò)增區(qū)域和純化區(qū)之間設(shè)計(jì)有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進(jìn)行試劑、標(biāo)本等物品傳送,配制的試劑通過(guò)單向傳遞窗由試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞到標(biāo)本制備區(qū),處理過(guò)的標(biāo)本通過(guò)單向傳遞窗由標(biāo)本制備區(qū)傳遞到PCR擴(kuò)增區(qū),按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標(biāo)本試劑不受污染,又保障了標(biāo)本試劑不污染環(huán)境。
2、人流:人員通過(guò)閘間分別進(jìn)入各自實(shí)驗(yàn)區(qū)域,進(jìn)出各實(shí)驗(yàn)區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服,手消毒等。
壓差設(shè)計(jì)
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)計(jì)為負(fù)壓潔凈室,通過(guò)壓差控制,使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染,并且降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
各個(gè)實(shí)驗(yàn)室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓,>10Pa,實(shí)驗(yàn)與閘間之間的氣流組織方向?yàn)椋涸噭?zhǔn)備區(qū)空氣流向閘間,標(biāo)本制備區(qū)流向閘間,而PCR擴(kuò)增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴(kuò)增區(qū),純化區(qū)同理;
壓力梯度來(lái)實(shí)現(xiàn)單向氣流組織方向,由試劑準(zhǔn)備區(qū)(+20Pa)、標(biāo)本制備區(qū)(+15Pa)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)(-5Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)(-20Pa)、到后純化區(qū)(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負(fù)壓壓力梯度。
四、其它安全設(shè)施
PCR實(shí)驗(yàn)室為潔凈空調(diào)系統(tǒng),系統(tǒng)形式采用直流系統(tǒng)不回風(fēng),防止交叉污染;試劑準(zhǔn)備間設(shè)計(jì)超凈臺(tái),保證試劑免受空氣環(huán)境污染;標(biāo)本制備間設(shè)計(jì)生物安全柜,保證標(biāo)本不污染室內(nèi)環(huán)境,并保證標(biāo)本免受環(huán)境污染。
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