標(biāo)準(zhǔn)PCR實(shí)驗(yàn)室的注意事項(xiàng):
①各個(gè)工作區(qū)標(biāo)志需要明確落實(shí),避免不同實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)設(shè)備或材料物品交叉濫用,導(dǎo)致污染;
②在不同的區(qū)域內(nèi)工作,實(shí)驗(yàn)人員需著各自對(duì)應(yīng)的實(shí)驗(yàn)工作服,在離開工作區(qū)域時(shí),便不得將工作服帶出工作區(qū)域;
③進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域內(nèi)必須保證單一方向操作,即試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴(kuò)增區(qū),不得逆向流動(dòng);
④燈具方面:需選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的目的。在三個(gè)試驗(yàn)工作區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部及傳送窗內(nèi)部都裝有紫外燈,以便消毒。在試劑預(yù)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還裝置移動(dòng)紫外線燈,對(duì)試驗(yàn)桌進(jìn)行部分消毒。紫外燈波長(zhǎng)為254mm,每20m一支40W的紫外燈。
⑤氣流方面:為防止環(huán)境對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的影響,各實(shí)驗(yàn)區(qū)的氣流方向設(shè)置為:空氣由試劑準(zhǔn)備區(qū)流向緩沖區(qū),標(biāo)本制備區(qū)流向緩沖區(qū),緩沖區(qū)流向PCR擴(kuò)增區(qū);
工作時(shí),應(yīng)使緩沖區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)為負(fù)壓,其它各室為“0”壓或“+”壓。各區(qū)域之間應(yīng)具備單間的實(shí)驗(yàn)工藝流,物流,人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)室之間的相互干擾,防止氣溶膠擴(kuò)散對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送風(fēng)排風(fēng)的比例,以保證個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力適宜。
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